Иммунофенотипическая характеристика волокнистого компонента гематотестикулярного барьера у пациентов с необструктивной азооспермией после применения клеточной терапии

Цель исследования – иммуногистохимическая оценка коллагенов тестикулярной ткани при лечении пациентов с необструктивной азооспермией аутоплазмой, обогащенной тромбоцитарными факторами роста (АОТ), в комбинации с экстракорпоральной ударно-волновой терапией (ЭУВТ).

Материалы и методы. В работе использовали биопсийный материал фрагментов яичек 14 пациентов с секреторной формой азооспермии до и после курса комбинированной терапии – АОТ с ЭУВТ (патент № RU2738543 от 14.12.2020). Средний возраст пациентов составил 33,07 ± 4,64 года (28–43 года), средняя продолжительность заболевания – 4,1 ± 2,26 года (1–9 лет). Лечение проводилось в течение 6 нед – по 2 сеанса в неделю: 1-й сеанс – инъекции АОТ в яичко, семенной канатик под ультразвуковым контролем с последующей активацией ее с помощью ЭУВТ (Dornier Aries); 2-й сеанс – ЭУВТ на яички и придатки яичек. Биопсийный материал яичка оценивали с помощью иммуногистохимического метода (антитела к коллагену I, III и IV типов) за 90 дней до начала терапии и через 180 дней после последнего лечебного сеанса.

Результаты. До проведения терапии доля коллаген-позитивных клеток составила: коллаген I типа – 22,9 ± 4,2 % (р <0,05), III типа – 7,3 ± 2,2 % (p <0,05), IV типа – 21,4 ± 1,5 % (р <0,05). После проведения комбинированного лечения АОТ с ЭУВТ: коллаген I типа – 27,3 ± 5,7 % (р <0,05), III типа – 7,2 ± 1,5 % (р <0,05), IV типа – 32,2 ± 2,6 % (р <0,05).

Выводы. Продукция биологически активных веществ на фоне комбинированного лечения АОТ с ЭУВТ стимулирует синтез разных типов коллагена, что способствует восстановлению волокнистого компонента гематотестикулярного барьера и улучшению сперматогенеза.

1. WHO Laboratory manual for the examination and processing of human semen, 5th edn. Geneva, 2010.

2. Lee J.W., Kwon O.H., Kim T.K. et al. Platelet-rich plasma: quantitative assessment of growth factor levels and comparative analysis of activated and inactivated groups. Arch Plast Surg 2013;40(5):530–5. DOI: 10.5999/aps.2013.40.5.530.

3. Pavlovic V., Ciric M., Jovanovic V. et al. Platelet Rich Plasma: a short overview of certain bioactive components. Open Med (Wars) 2016;11(1):242–7. DOI: 10.1515/med-2016-0048.

4. Virag R., Sussman H., Lambion S. et al. Evaluation of the benefit of using a combination of autologous platelet rich-plasma and hyaluronic acid for the treatment of Peyronie’s disease. Sex Health Issues 2017;1(1):1–8. DOI: 10.15761/SHI.1000102.

5. Epifanova M.V., Gvasalia B.R., Durashov M.A. et al. Platelet-rich plasma therapy for male sexual dysfunction: myth or reality? Sex Med Rev 2020;8(1):106–13. DOI: 10.1016/j.sxmr.2019.02.002.

6. Hatanaka K., Ito K., Shindo T. et al. Molecular mechanisms of the angiogenic effects of low-energy shock wave therapy: roles of mechanotransduction. Am J Physiol Cell Physiol 2016;311(3):378–85. DOI: 10.1152/ajpcell.00152.2016.

7. Pan M.M., Raees A., Kovac J.R. Low-intensity extracorporeal shock wave as a novel treatment for erectile dysfunction. Am J Mens Health 2016;10(2):146–8. DOI: 10.1177/1557988315574511.

8. Liu T., Shindel A.W., Lin G. et al. Cellular signaling pathways modulated by low-intensity extracorporeal shock wave therapy. Int J Impot Res 2019;31(3):170–6. DOI: 10.1038/s41443-019-0113-3.

9. Mariotto S., Cavalieri E., Amelio E. et al. Extracorporeal shock waves: from lithotripsy to anti-inflammatory action by NO production. Nitric Oxide 2005;12(2):89–96. DOI: 10.1016/j.niox.2004.12.005.

10. Lin G., Reed-Maldonado A.B., Wang B. et al. In situ activation of penile progenitor cells with low-intensity extracorporeal shockwave therapy. J Sex Med 2017;14(4):493–501. DOI: 10.1016/j.jsxm.2017.02.004.

11. Bos-Mikich A., de Oliveira R., Frantz N. Platelet-rich plasma therapy and reproductive medicine. J Assist Reprod Genet 2018;35(5):753–6. DOI: 10.1007/s10815-018-1159-8.

12. Rassweiler J. Re: Extracorporeal shock wave therapy (ESWT) in urology: a systematic review of outcome in peyronie’s disease, erectile dysfunction, and chronic pelvic pain. Eur Urol 2018;74(1):115–7. DOI: 10.1016/j.eururo.2018.01.037.

13. Simplicio C.L., Purita J., Murrell W. et al. Extracorporeal shock wave therapy mechanisms in musculoskeletal regenerative medicine. J Clin Orthop Trauma 2020;11(Suppl 3):S309–18. DOI: 10.1016/j.jcot.2020.02.004.

14. Zaporozhan V., Kholodkova O., Kuleshova O. Platelet-rich plasma induces morphofunctional restoration of mice testes following doxorubomycine hydrochloride exposure. J Exp Clin Med 2014;31(3):183–7.

15. Dehghani F., Sotoude N., Bordbar H. et al. The use of platelet-rich plasma (PRP) to improve structural impairment of rat testis induced by busulfan. Platelets 2019;30(4):513–20. DOI: 10.1080/09537104.2018.1478400.

16. Епифанова М.В., Епифанов А.А., Артеменко С.А. Способ лечения мужского бесплодия. Патент на изобретение РФ № RU2738543 от 14.12.2020. Бюлл. № 35 от 14.12.2020.

17. Юшков Б.Г. Клетки иммунной системы и регуляция регенерации. Бюллетень сибирской медицины 2017;16(4):94–105.

18. He Z., Feng L., Zhang X. et al. Expression of Col1a1, Col1a2 and procollagen I in germ cells of immature and adult mouse testis. Reproduction 2005;130(3):333–41. DOI: 10.1530/rep.1.00694.

19. Siu M.K., Cheng C.Y. Extracellular matrix and its role in spermatogenesis. Adv Exp Med Biol 2008;636:74-91. DOI: 10.1007/978-0-387-09597-4_5.

20. Rah D.K., Min H.J., Kim Y.W. et al. Effect of platelet-rich plasma on ischemia-reperfusion injury in a skin flap mouse model. Int J Med Sci 2017;14(9):829–39. DOI: 10.7150/ijms.19573.

21. Josh F., Soekamto T.H., Adriani J.R. et al. The combination of stromal vascular fraction cells and platelet-rich plasma reduces malondialdehyde and nitric oxide levels in deep dermal burn injury. J Inflamm Res 2021;14: 3049–61. DOI: 10.2147/JIR.S318055.

22. Rizal D.M., Puspitasari I., Yuliandari A. Protective effect of PRP against testicular oxidative stress on D-galactose induced male rats. AIP Conference Proceedings 2020;2260:040005. DOI: 10.1063/5.0015830.